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Hamilton 离子排斥色谱柱在使用前要进行活化操作

发布时间:2022-07-14

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  离子色谱柱是离子色谱系统的心脏,只有性能优良的色谱柱才能达到良好的分离效果,这对色谱柱材料,填充料(交换树脂)、柱尺寸、装柱技术等均有一定的要求。柱两端均有微孔筛板以防试料或洗脱液中的细微颗粒进入柱中,影响柱中树脂的渗透性。
 
  Hamilton 离子排斥色谱柱的活化操作,以常见的C18反相分析柱为例,出厂时一般都封装有甲醇或乙腈等有机溶剂。随着时间的推移,色谱柱内的有机溶剂缓慢挥发,色谱柱内可能出现气泡。因此,新购买的色谱柱在使用前一般都要进行活化操作。
 
  下面以常见的4.6mmX150mm,5μm粒径的C18反相分析柱为例:
 
  1.在活化色谱柱前,应先用相关试剂冲洗液相系统的流路,确保无污染物残留。切换至封柱试剂(一般为甲醇或乙腈),置换流路内的试剂。
 
  2.停泵,将分析柱的进液口连上系统,移除出液口的堵头,出液口不连上系统。倾斜放置色谱柱,使其出液口高于入液口。
 
  3.以0.1ml/min的流速冲洗色谱柱约5分钟,切换至0.2ml/min的流速继续冲洗。观察色谱柱出液口,若连续出液,停泵,将色谱柱出液口接入液相系统。
 
  4.以0.1ml/min的流速冲洗色谱柱,5分钟内将流速平稳提升至0.5ml/min继续冲洗色谱柱。
 
  5.以0.5ml/min的流速冲洗色谱柱,期间观察压力与基线是否平稳,直到冲洗的总流量达到30个柱体积。
 
  6.活化完成:对于久置不用的类似型号色谱柱,再次使用前也可参考上述步骤进行活化。
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