1、确定zui佳分离状态时的流动相pH

2、选择具有与流动相pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）

3、确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）

缓冲液的使用：

（1）使用前必须过滤。

（2）使用后一定要进行清洗，以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用含5%甲醇 的水溶液冲洗30min（1ml/min），再用甲醇冲洗30min。

（3）用纯水冲洗泵头清洗管路。

（4）易受到细菌和霉菌的影响。